연층
연층(Buffy coat)은 혈액을 원심분리한 후 나오는 층의 일부로 대부분의 백혈구와 혈소판을 포함하는 면역 반응 및 항응고 작용을 하는 세포가 모인 층이다.[1][2]
설명[편집]
혈액을 원심분리한 후 투명한 액체층(혈장), 대부분의 적혈구를 포함하는 붉은 액체층(혈구), 그 사이의 얇은 층으로 구별할 수 있다. 혈액 샘플 총 부피의 1% 미만을 구성하는 연층(보통 색상이 담황색)에는 대부분의 백혈구와 혈소판이 포함된다.[3][4] 연층은 일반적으로 희끄무레하지만 때때로 혈액 샘플에 녹색 골수세포형과산화효소가 높은 호중구가 많이 포함되어 있는 경우 녹색을 띈다. 연층의 아래 층에는 과립구와 적혈구가 포함된다.
연층은 일반적으로 DNA 추출에 사용되며 백혈구는 약 10배 더 농축된 유핵 세포 공급원을 제공한다.[5][6] 포유류의 적혈구는 핵이 없고 DNA를 포함하지 않기 때문에 포유류의 혈액에서 추출된다. 일반적인 프로토콜은 향후 DNA 분리를 위해 연층 표본을 저장하는 것이며 이들은 수년 동안 냉동 보관 상태로 유지될 수 있다.[7]
일부는 피콜 밀도 구배로 세포를 분리할 때 연층을 참조한다.[8][9]
진단 용도[편집]
혈액 성분의 원심 층화를 기반으로 하는 정량적 연층(QBC)은 말라리아 기생충 및 기타 혈액 기생충을 검출하기 위한 실험 방법이다.[10]
아크리딘 오렌지(형광 염료)로 코팅된 QBC 모세관에 혈액을 채취하고 원심분리한다. 형광성 기생 적혈구는 적혈구와 연층 사이의 경계면에서 자외선 형광현미경으로 관찰할 수 있는 층에 집중된다.[10] 이 검사는 기존의 혈액 도말 검사보다 더 민감하며 사례의 90% 이상에서 기생충 종도 식별할 수 있다.[11][12]
백혈구 수가 극도로 낮은 경우 다양한 유형의 백혈구를 수동으로 감별하는 것이 어려울 수 있으며 자동 감별을 얻는 것이 사실상 불가능할 수 있다. 이러한 경우 임상병리사는 혈액 도말을 만드는 연층을 얻을 수 있다. 이 도말 검사에는 전혈보다 훨씬 더 많은 수의 백혈구가 포함되어 있다.[13]
참고[편집]
각주[편집]
- ↑ (영어), Churchill Livingstone
|제목=이(가) 없거나 비었음 (도움말) - ↑ Puckrin, Zara. “Protocol for PBMC isolation from buffy coat samples”. 《www.reprocell.com》 (미국 영어). 2022년 8월 9일에 확인함.
- ↑ Mescher, Anthony L. (2018). 〈Blood〉. 《Junqueira's Basic Histology: Text and Atlas》 (영어) 15판. McGraw-Hill Education. 237쪽. ISBN 9781260026184.
- ↑ Marieb, Elaine N. (2007). 《Human Anatomy & Physiology》 Seven판. San Francisco: Pearson Benjamin Cummings. ISBN 978-0-8053-5910-7.
- ↑ Mychaleckyj, Josyf C; Farber, Emily A; Chmielewski, Jessica; Artale, Jamie; Light, Laney S; Bowden, Donald W; Hou, Xuanlin; Marcovina, Santica M (2011년 6월 10일). “Buffy coat specimens remain viable as a DNA source for highly multiplexed genome-wide genetic tests after long term storage”. 《Journal of Translational Medicine》 9: 91. doi:10.1186/1479-5876-9-91. ISSN 1479-5876. PMC 3128059. PMID 21663644.
- ↑ Fabre, Anne-Lise; Luis, Aurélie; Colotte, Marthe; Tuffet, Sophie; Bonnet, Jacques (2017년 11월 30일). “High DNA stability in white blood cells and buffy coat lysates stored at ambient temperature under anoxic and anhydrous atmosphere”. 《PLOS ONE》 12 (11): e0188547. Bibcode:2017PLoSO..1288547F. doi:10.1371/journal.pone.0188547. PMC 5708797. PMID 29190767.
- ↑ Gustafson, Sarah; Proper, Jacqueline A.; Bowie, E. J. Walter; Sommer, Steve S. (1987년 9월 1일). “Parameters affecting the yield of DNA from human blood”. 《Analytical Biochemistry》 (영어) 165 (2): 294–299. doi:10.1016/0003-2697(87)90272-7. ISSN 0003-2697. PMID 3425899.
- ↑ Louzao, Raul. “Buffy Coat Isolation for Manual Ficoll Methods 0001”. 《YouTube》.
- ↑ Marketing, Metric (2021년 3월 25일). “What is Buffy Coat in Blood? Buffy Coat Preparation and Buffy Coat Cell Extraction”. 《Akadeum Life Sciences》 (영어). 2022년 8월 9일에 확인함.
- ↑ 가 나 Ahmed, Nishat Hussain; Samantaray, Jyotish Chandra (2014). “Quantitative Buffy Coat Analysis-An Effective Tool for Diagnosing Blood Parasites”. 《Journal of Clinical and Diagnostic Research》 8 (4): DH01. doi:10.7860/JCDR/2014/7559.4258. ISSN 2249-782X. PMC 4064892. PMID 24959448.
- ↑ Sherman, Angel (2018). 《Medical Parasitology》. EDTECH. ISBN 9781839473531.
- ↑ Kochareka, Manali; Sarkar, Sougat; Dasgupta, Debjani; Aigal, Umesh (October 2012). “A preliminary comparative report of quantitative buffy coat and modified quantitative buffy coat with peripheral blood smear in malaria diagnosis”. 《Pathogens and Global Health》 106 (6): 335–339. doi:10.1179/2047773212Y.0000000024. PMC 4005131. PMID 23182137.
- ↑ Blumenreich, Martin S. (1990). 〈The White Blood Cell and Differential Count〉. 《Clinical Methods: The History, Physical, and Laboratory Examinations》 3판. Butterworths. ISBN 978-0-409-90077-4. PMID 21250104.